层析柱如何使用

1 吸附剂的处理及柱子装填
　　将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚比例泵人溶剂，至溶剂流出止。有机玻璃管
2 上样
     将物质用适量丙酮溶解，泵人层析柱柱头，然后泵人石油醚。
3 洗脱
　　以一定比例的石油醚一丙酮为洗脱液，60ML／MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～3KG／C 。至洗脱*，相同流份合并，回收溶剂。将物质合并蒸干。加人适量甲醇热溶后自然放置，析出结晶。
4 层析柱再生、平衡 有机玻璃管
　　有效成分经TLC检识全部流出后，用纯丙酮5000ML再生，丙酮一石油醚（5：95）平衡后，可再次上样，反复使用。
5 重结晶
　　结晶析出*后，减压过滤，然后用少量甲醇洗涤。将冬凌草甲素再用适量甲醇热溶后放置，结晶再次析出，待结晶*后，抽滤，用少量乙醚洗涤，将结晶室温下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。有机玻璃管
6 薄层层析柱分析
　　于105度烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿色斑点，没有杂质斑痕。